《地宮筆記之五百龍首》以南京城河底發現的水下古墓為背景，聚焦考古學者王教授（高玉慶飾）與曹欣欣（楊欣穎飾）對未知遺跡的執著追尋。意外卷入其中的齊小白（劉冠麟飾）雖無專業技能，卻憑借機敏與運氣在探險中屢次化險為夷。三人組隊深入這座布滿機關的千年地宮，先后遭遇水壓坍塌、青銅鎖龍陣及嗜血冥魚群等致命危機。隨著探索推進，古墓中暗藏的"五百龍首"陪葬奇觀與明代治水秘史逐漸浮出水面。最終在核心密室里，眾人面對價值連城的鎮河寶珠時陷入抉擇困境——取走文物將導致古墓結構崩塌，而放棄則意味著考古發現永遠埋藏水底。在生死考驗與學術良知的交鋒中，團隊成員間建立起超越利益的信任紐帶。